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    1. 證券簡稱:海能技術
      證券代碼:430476
             
             

      凱氏定氮法測定蒙牛酸奶中蛋白質含量

      1 前言

      凱氏定氮法是測定蛋白質最經典,也是最常用的方法,樣品在加速劑(硫酸銅(催化劑);硫酸鉀(提高沸點))的參與下,加入濃硫酸進行消解時,各種含氮有機化合物,經過復雜的高溫分解反應,轉化為銨態氮,堿化后蒸餾出來的氨用硼酸吸收,以酸標準溶液滴定,最后計算出蛋白質的含量。

      2 材料與方法

      2.1 儀器

      Hanon K1100凱氏定氮儀(濟南海能儀器有限公司);Hanon SH220石墨消解儀(濟南海能儀器有限公司,可同時消解20個);分析天平;消化管(濟南海能儀器有限公司,與消解儀、定氮儀配套);烘箱

      2.2 主要試劑

      濃硫酸(18.4g/ml,AR);硫酸銅,AR;硫酸鉀,AR;硼酸(20g/L,按混合指示劑:硼酸=1:100加入指示劑);40%氫氧化鈉溶液;混合指示劑(1份0.1%甲基紅乙醇溶液與5份0.1%溴甲酚綠乙醇溶液臨用時混合);蒸餾水;硫酸標準溶液[C(1/2H2SO4)=0.1037mol/L]。

      2.3 實驗步驟

      2.3.1 消化

      采用減量法準確稱取1g(精確至0.0001g)酸奶樣品(注意不要掛壁),加入0.2g硫酸銅,3.0g硫酸鉀,再加入8.5ml濃硫酸,搖勻(3種酸奶各做6個平行)。將消化管置于Hanon SH220石墨消解爐上,先設定200℃,加熱30min,再設定300℃,加熱30min再將溫度調制380℃,加熱30min,此時消解液變綠,再調至420℃消解30min,冷卻,待蒸餾(同時做兩個空白試驗)。

      2.3.2 蛋白質含量的測定

      將冷卻后的消化管置于Hanon K1100全自動凱氏定氮儀上進行測定。先檢查定氮儀,確認冷凝水已經打開,按照儀器提示設定好參數,稀釋水10ml、硼酸20ml、加堿40ml、蒸餾5min,蒸餾完成后儀器進行自動滴定并計算打印樣品的含氮量以及蛋白質含量。

      3 結果與討論

      3.1 蒙牛紅棗酸奶的蛋白質含量

      通過以上三種酸奶的測定結果可以看出,采用Hanon k1100自全動凱氏定氮儀測得的結果平行性較好,絕對相差及相對平均偏差都在允許范圍之內,測得的蛋白質含量與包裝標注的基本一致,且操作簡便,省時省力,極大提高實驗速度。

      參考文獻(無)

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